ELISA: фермента с помощью иммуноферментного анализа,Принцип техники ELISA:

ELISA: фермента с помощью иммуноферментного анализа, это способ, которым антитело или антиген и определили точно этот тест также известен как ИФА, иммуноферментный анализ и ОВОС, в ELISA, сочетание иммунологические и биохимические принципы employed.Radio Immunoassay был единственным доступный метод для обнаружения антител или antgen до ELISA был изобретен.

Принцип техники ELISA:

В ELISA техники, неизвестное количество антигена прикол или проставляться на поверхности пластины микротитровальных полистирола, а также специфических антител промывают по этой поверхности, где неизвестное количество антигена прикол или проставляться, так что иммунологическая реакция, и они Форма комплекс антиген-антитело. Антител которая захлестнула фиксированного антигена связана с ферментом, с целью запуска биохимические реакции, которые можно сделать видимым или измерить как сигнал завершения реакции антител антигена. В флуоресценции ELISA реакция вызвана фермента приводит к флуоресценции, когда свет подходящей длины волны передается на образец, величина флуоресценции быть измерена.

В ELISA один пример фермента пероксидазы, которая реагирует с субстратом тетра 3,3, 5'5 methylebenzidine которые производит цвета в качестве индикатора на наличие антигенов или антител.

ELISA требует по крайней мере один антител, специфической для определенного антигена.

Порядок действий:

1.The образца, содержащего неизвестные неизвестное количество антигена первых, иммобилизованных на твердой поддержке полистирола пластины микротитровальных это связано явление, известное как адсорбции, если антиген малоадсорбирующихся, то это первый связан с антителами, который имеет хорошую сродство поверхности адсорбированными получить, то это также известный как сэндвич "ELISA

2.After образец, содержащий антиген иммобилизованных то обнаружение антител добавил над ним образующий комплекс с иммобилизованными антителами обнаружения antigen.This связана с ферментом ковалентно или через bioconjugation,

3.После каждый шаг пластины тщательно вымыты с раствором мягкого ПАВ для удаления несвязанных неспецифических антигенов и белков. В последнем шаге помыть пластины добавил субстрат, который находится под воздействием добавил или фермента, связанного и производит видимых или обнаруженный сигнал, который можно измерить количественно количество антигена в образце.

ИФА методы также использовать с указанием иммунологических и биохимических полимеразной цепной реакции (ПЦР в реальном времени), флуорогенных, electrochemiluminescent для легкости обнаружения и измерения.

Новые методы ИФА также использовать, не связанный фермент-антитела, вместо этого они используют неферментативного репортер.

ИФА методы используются в качестве инструмента контроля качества на производстве и биофармацевтического производства в различных фармацевтических препаратов. Она также используется для выявления антигена ВИЧ.